Экспресс тест на выявления Лямблий (Джиардия интестиналис)

Экспресс-тест Giardia intestinalis предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления выявления Giardia (лямблий). Может использоваться в домашних условиях. В качестве образцов для анализа используется кал. В наборе 10 тестов.

ИНФОРМАЦИЯ

Лямблиоз – это кишечное заболевание, вызываемое одноклеточными простейшими Giardia intestinales (синонимы Giardia lamblia, Giardia duodenalis). Лямблиоз передается фекально-оральным, а также через загрязненную воду. Основные симптомы лямблиоза – диарея, водянистый стул, желудочные спазмы. Симптомы обычно появляются в течение первой недели после инфицирования и могут продолжаться от 2 до 6 недель, что приводит к потере веса и обезвоживанию организма. У пожилых людей, людей с трансплантированными органами, ВИЧ-инфицированных или больных раком лямблиоз может вызвать осложнения, приводящие к тяжелой болезни и смерти.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце клеток Giardia они вступают в реакцию с нанесенными на стартовую зону специфическими моноклональными антителами против Giardia, меченными окрашенными частицами, и продолжают движение с током жидкости. В аналитической зоне тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенного иммунного комплекса. 

В контрольной зоне тест-полоски специфический окрашенный иммунный комплекс образуется независимо от наличия в тестируемом биологическом материале клеток Giardia. 

В том случае, если в анализируемом образце присутствуют клетки Giardia, на тест-полоске образуются две параллельные линии (красная аналитическая, обозначенная буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа. В случае отсутствия в анализируемом образце клеток Giardia на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа.

СОСТАВ

Один комплект тестов «РЭД Giardia» включает:

• тест-полоски иммунохроматографические «РЭД Giardia» в кассетах из пластика белого цвета – 10 шт.;
• пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 10 шт., соответственно;
• этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 10 шт., соответственно;
• инструкцию по применению теста «РЭД Giardia» – 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.

Комплект тестов «РЭД Giardia» упакован в картонную коробку.

НЕОБХОДИМЫЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В СОСТАВ НАБОРА

• контейнеры для сбора образцов кала;
• одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
• часы или таймер.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в течение первой недели после появления симптомов, т.к. спустя неделю после инфицирования количество клеток Giardia значительно уменьшается.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и  ниже.

Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до  комнатной температуры.

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо. 

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество анализируемого образца. Для этого ввести стержень в  3  разные зоны образца, собрав примерно 150 мг кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать 150 мкл с помощью пипетки. Ввести стержень с образцом в  пробирку с  буфером для растворения образца и плотно завинтить крышкукапельницу (рис. 1-2).
2. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД Giardia» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).

3. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.

4. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД Giardia», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на  ровную горизонтальную поверхность.

5. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты, обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе с  жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД  Giardia».

6. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

 Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала клеток Giardia (рис. 3-1).

Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (С и Т) свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала клеток Giardia (рис. 3-2). Интенсивность красной аналитической линии (Т) в тестовом окошке кассеты может меняться в зависимости от концентрации клеток Giardia в образце.

В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только красная аналитическая линия (Т), результат анализа признается недействительным (рис. 3-3). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД Giardia».

Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В  этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД Giardia».

Результаты, полученные с использованием теста «РЭД Giardia», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.