Экспресс тест полоски на Криптоспоридиоз (Cryptosporidium parvum)

Экспресс-тест «РЭД Cryptosporidium» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления Cryptosporidium parvum. Может использоваться в домашних условиях. В качестве образцов для анализа используется кал. В наборе 10 тестов.

ИНФОРМАЦИЯ

Криптоспоридиоз – это кишечное заболевание, вызываемое одноклеточными простейшими Cryptosporidium parvum. Криптоспоридиоз передается фекально-оральным путем. Основные симптомы криптоспоридиоза – водянистая диарея, острые желудочные боли, потеря веса, тошнота, иногда жар. Симптомы обычно появляются в течение первой недели после инфицирования.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце клеток Cryptosporidium parvum они вступают в реакцию с нанесенными на стартовую зону специфическими моноклональными антителами против Cryptosporidium parvum, меченными окрашенными частицами, и продолжают движение с током жидкости. В аналитической зоне тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенного иммунного комплекса.

В контрольной зоне тест-полоски специфический окрашенный иммунный комплекс образуется независимо от наличия в тестируемом биологическом материале клеток Cryptosporidium.

В том случае, если в анализируемом образце присутствуют клетки Cryptosporidium, на тест-полоске образуются две параллельные линии (красная аналитическая, обозначенная буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа. В случае отсутствия в анализируемом образце клеток Cryptosporidium на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа.

СОСТАВ

Один комплект тестов «РЭД Cryptosporidium» включает:

• тест-полоски иммунохроматографические «РЭД Cryptosporidium» в кассетах из пластика белого цвета – 10 шт.;
• пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 10 шт., соответственно;
• этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 10 шт., соответственно;
• инструкцию по применению теста «РЭД Cryptosporidium» – 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем. Комплект тестов «РЭД Cryptosporidium» упакован в картонную коробку.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в течение первой недели после появления симптомов заболевания, т.к. спустя  неделю  после  инфицирования  количество  клеток  Cryptosporidium  значительно уменьшается.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и ниже. 

Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры. 

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

1.  Снять  крышку-капельницу  с  пробирки  и  с  помощью  стержня  на  крышке  взять небольшое  количество  анализируемого  образца.  Для  этого  ввести  стержень  в  3 разные зоны образца, собрав примерно 150 мг кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать  150  мкл  с  помощью  пипетки.  Ввести  стержень  с  образцом  в  пробирку с  буфером  для  растворения  образца  и  плотно  завинтить  крышку-капельницу (рис.  1-2).

2.  Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис.  2-1).

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД Cryptosporidium» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).

3.  Встряхнуть пробирку с раствором образца. Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы (рис. 2-1).

4.  Непосредственно  перед  началом  анализа  вскрыть  упаковку  теста  «РЭД Cryptosporidium»,  разрывая  ее  вдоль  прорези.  Извлечь  кассету  с  тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.

5.  4  капли  (примерно  100  мкл)  жидкого  образца  внести  в  круглое  окошко  кассеты, обозначенное  буквой  S,  избегая  попадания  твердых  частиц  образца  вместе с  жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную  пробирку с  буфером для растворения образца и отдельный  тест  «РЭД Cryptosporidium».

6.  Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала клеток Cryptosporidium (рис. 3-1).

Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (С и Т) свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала клеток Cryptosporidium (рис. 3-2). Интенсивность красной аналитической линии (Т) в тестовом окошке кассеты может меняться в зависимости от концентрации клеток Cryptosporidium в образце.В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только красная аналитическая линия (Т), результат анализа признается недействительным (рис. 3-3). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД Cryptosporidium». 

 Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД Cryptosporidium».

 Результаты,  полученные  с  использованием  теста  «РЭД  Cryptosporidium»,  являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.