Экспресс-тест полоски РЭД на Кальпротектин (Calprotectin) 50+200

Тест «РЭД кальпротектин 50+200» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого полуколичественного определения кальпротектина. Может использоваться в домашних условиях. В качестве образцов для анализа используется кал. В наборе 10 тестов.

ИНФОРМАЦИЯ

Кальпротектин – белок, продуцируемый нейтрофилами слизистой оболочки кишечника. Высокий уровень кальпротектина свидетельствует о воспалении в слизистой оболочке кишечника, а также является предиктором близкого обострения у пациентов с болезнью Крона, язвенным колитом. Кальпротектин стабилен в кале в течение нескольких дней.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающими участками тест-полосок А и В. При наличии в образце кальпротектина он вступает в реакцию с нанесенными на стартовые зоны тест-полосок А и В специфическими моноклональными антителами против кальпротектина, меченными окрашенными частицами, и продолжает движение с током жидкости. В аналитических зонах тест-полосок А и В происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембран, с образованием окрашенных иммунных комплексов.

В контрольных зонах тест-полосок А и В специфические окрашенные иммунные комплексы образуются независимо от наличия в тестируемом биологическом материале кальпротектина.

В том случае, если в анализируемом образце кальпротектин отсутствует или его концентрация ниже 50 мкг/г, на тест-полосках А и В образуется по одной зеленой контрольной линии (С).

В том случае, если в анализируемом образце присутствует кальпротектин в концентрации от 50 до 200 мкг/г, на тест-полоске А образуются две параллельные окрашенные линии (красная аналитическая Т и зеленая контрольная С), а на тест-полоске В – одна зеленая контрольная линия (С).

В том случае, если в анализируемом образце присутствует кальпротектин в концентрации выше 200 мкг/г, на тест-полосках А и В образуются по две параллельные окрашенные линии (красные аналитические Т и зеленые контрольные С).

СОСТАВ

Один комплект тестов «РЭД кальпротектин 50+200» включает:

• тест-полоски иммунохроматографические «РЭД кальпротектин 50» и «РЭД кальпротектин 200» в двойных кассетах из пластика белого цвета, по одной полоске каждого вида в кассете – 10 двойных кассет;
• пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 10 шт., соответственно;
• этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 10 шт., соответственно;
• инструкцию по применению теста «РЭД кальпротектин 50+200» – 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем. Комплект тестов «РЭД кальпротектин 50+200» упакован в картонную коробку.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.
Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в первые 1-3 дня после появления симптомов.
Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 7 сут., при необходимости более длительного (до 6 месяцев) хранения – при температуре –20°С и ниже. 

Перед  анализом  образцы  кала  должны  быть  полностью  разморожены  и  доведены до  комнатной температуры. 

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

1.  Снять  крышку-капельницу  с  пробирки  и  с  помощью  стержня  на  крышке  взять небольшое количество анализируемого образца кала,  примерно 10-20 мг (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать 10-20 мкл с помощью пипетки.

2.  Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).

3.  Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис.  2-1).

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД кальпротектин 50+200» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).

4.  Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.

5.  Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД кальпротектин 50+200», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полосками и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.

 6.  По 4 капли (примерно по 100 мкл) жидкого образца внести в каждое круглое окошко кассеты (А и В), обозначенные буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе  с  жидкостью  (рис.  2-2).  Для  каждого  образца  или  контроля  необходимо 
использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД кальпротектин 50+200».

 7.  Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Выявление в тестовых окошках А и В кассеты по одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа (рис. 3-1), т.е. указывает на то, что кальпротектин в анализируемом образце кала отсутствует или его концентрация ниже 50 мкг/г. 

Выявление в тестовом окошке А кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой С и красной Т) и в тестовом окошке В одной зеленой контрольной линии (С) указывает на наличие в анализируемом образце кала кальпротектина в концентрации равной или  выше 50 и ниже 200 мкг/г (рис. 3-2).

 Выявление в тестовых окошках А и В кассеты по две параллельных окрашенных линии (зеленой С и красной Т) указывает на наличие в анализируемом образце кала кальпротектина в концентрации равной или выше 200 мкг/г (рис. 3-3).

В тех случаях, когда в тестовых окошках кассеты не образуется ни одной окрашенной линии, или хотя бы в одном тестовом окошке не образуется зеленой контрольной линии, или  в  тестовом  окошке  А  образуется  только  зеленая  контрольная  линия,  а  в  тестовом окошке В – две параллельных окрашенных линии (зеленая и красная), результат анализа признается недействительным (рис. 4). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД кальпротектин 50+200». 

Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовых окошках кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В  этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и  повторить анализ с использование другого теста «РЭД кальпротектин 50+200».

Лечение  нестероидными  противовоспалительными  препаратами  может  привести к  ложноположительным результатам теста «РЭД кальпротектин 50+200».

Результаты, полученные с использованием теста «РЭД кальпротектин 50+200», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.