Экспресс-тест полоски РЭД на Кальпротектин (Calprotectin)

Тест «РЭД кальпротектин 50+200» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого полуколичественного определения кальпротектина. Может использоваться в домашних условиях. В качестве образцов для анализа используется кал. В наборе 10 тестов.

ИНФОРМАЦИЯ

Кальпротектин – белок, продуцируемый нейтрофилами слизистой оболочки кишечника. Высокий уровень кальпротектина свидетельствует о воспалении в слизистой оболочке кишечника, а также является предиктором близкого обострения у пациентов с болезнью Крона, язвенным колитом. Кальпротектин стабилен в кале в течение нескольких дней.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающими участками тест-полосок А и В. При наличии в образце кальпротектина он вступает в реакцию с нанесенными на стартовые зоны тест-полосок А и В специфическими моноклональными антителами против кальпротектина, меченными окрашенными частицами, и продолжает движение с током жидкости. В аналитических зонах тест-полосок А и В происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембран, с образованием окрашенных иммунных комплексов.

В контрольных зонах тест-полосок А и В специфические окрашенные иммунные комплексы образуются независимо от наличия в тестируемом биологическом материале кальпротектина.

В том случае, если в анализируемом образце кальпротектин отсутствует или его концентрация ниже 50 мкг/г, на тест-полосках А и В образуется по одной зеленой контрольной линии (С).

В том случае, если в анализируемом образце присутствует кальпротектин в концентрации от 50 до 200 мкг/г, на тест-полоске А образуются две параллельные окрашенные линии (красная аналитическая Т и зеленая контрольная С), а на тест-полоске В – одна зеленая контрольная линия (С).

В том случае, если в анализируемом образце присутствует кальпротектин в концентрации выше 200 мкг/г, на тест-полосках А и В образуются по две параллельные окрашенные линии (красные аналитические Т и зеленые контрольные С).

СОСТАВ

Один комплект тестов «РЭД кальпротектин 50+200» включает:

• тест-полоски иммунохроматографические «РЭД кальпротектин 50» и «РЭД кальпротектин 200» в двойных кассетах из пластика белого цвета, по одной полоске каждого вида в кассете – 10 двойных кассет;
• пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 10 шт., соответственно;
• этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 10 шт., соответственно;
• инструкцию по применению теста «РЭД кальпротектин 50+200» – 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем. Комплект тестов «РЭД кальпротектин 50+200» упакован в картонную коробку.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в первые 1-3 дня после появления симптомов.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 7 сут., при необходимости более длительного (до 6 месяцев) хранения – при температуре –20°С и ниже. Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

 1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество анализируемого образца кала, примерно 10-20 мг (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать 10-20 мкл с помощью пипетки.

2. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).

3. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД кальпротектин» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С). 4. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы. 5. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД кальпротектин», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.

6. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты, обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе с жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД кальпротектин». 

7. Через 10 мин визуально оценить результат реакции. 

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ 

Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала кальпротектина (рис. 3-1). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (С и Т) свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала кальпротектина (рис. 3-2). Интенсивность красной аналитической линии (Т) в тестовом окошке кассеты может меняться в зависимости от концентрации кальпротектина в образце.

В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только красная аналитическая линия (Т), результат анализа признается недействительным (рис. 3-3). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД кальпротектин».

Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД кальпротектин».

Лечение нестероидными противовоспалительными препаратами может привести к ложноположительным результатам теста «РЭД кальпротектин».

Результаты, полученные с использованием теста «РЭД кальпротектин», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.